Différence principale - centrifugation préparative vs analytique

La centrifugation est une méthode de séparation dans laquelle l'application de la force centrifuge sédimente ou fractionne un mélange hétérogène. La microcentrifugation, la centrifugation à grande vitesse et l'ultracentrifugation sont les trois types de centrifugation en fonction du volume et de la vitesse utilisés dans le processus. Parmi les autres méthodes de centrifugation, l'ultracentrifugation utilise la vitesse angulaire maximale. La vitesse de rotation de l'ultracentrifugation atteint 1 000 000 g. Ainsi, l'ultracentrifugation est utilisée pour isoler de petites particules telles que des ribosomes, des protéines et des virus. La centrifugation préparative et analytique sont les deux types de méthodes d'ultracentrifugation. Les différence principale entre la centrifugation préparative et analytique est que la centrifugation préparative est utilisée pour agglomérer de petits matériaux tels que les membranes, les organites, les virus, l'ADN et l'ARN, tandis que la centrifugation analytique est utilisée pour déterminer la masse et la forme des macromolécules telles que les complexes protéiques et la vitesse de sédimentation des molécules.

Domaines clés couverts

1. Qu'est-ce que la centrifugation préparative - Définition, faits, utilisations 2. Qu'est-ce que la centrifugation analytique - Définition, faits, utilisations 3. Quelles sont les similitudes entre la centrifugation préparative et analytique – Aperçu des caractéristiques communes 4. Quelle est la différence entre la centrifugation préparative et analytique – Comparaison des principales différences

Termes clés: centrifugation analytique, processus analytiques, centrifugation à gradient de densité, centrifugeuse à grande vitesse, centrifugation préparative, petites particules

Qu'est-ce que la centrifugation préparative

La centrifugation préparative fait référence à une centrifugeuse à grande vitesse utilisée dans la séparation de petites particules submicroscopiques. Il sépare les petites particules telles que les virus, les particules virales, les complexes protéiques, les protéines, les lipoprotéines, l'ARN et l'ADN plasmidique. Une centrifugeuse préparative Beckman-Coulter avec son rotor à l'intérieur est illustrée à la figure 1.

Figure 1: Centrifugeuse préparatoire Beckman-Coulter

La centrifugation préparative peut également être utilisée comme méthode de centrifugation à gradient de densité. Le gradient de saccharose peut être utilisé pour séparer les organites cellulaires. Le gradient de césium peut être utilisé pour séparer les acides nucléiques.

Qu'est-ce que la centrifugation analytique

La centrifugation analytique fait référence à une centrifugeuse à grande vitesse utilisée dans les processus analytiques. Il est utilisé pour obtenir des informations sur les types de molécules dans un échantillon particulier en connaissant la forme globale, les changements de conformation et la stoechiométrie des sous-unités. Il peut également être utilisé pour déterminer la vitesse de sédimentation des particules. Une ultracentrifugeuse est montrée dans Figure 2.

Figure 2: Ultracentrifugeuse Beckman Coulter Optima LE-80K

Un système de détection optique est fourni avec la centrifugeuse analytique pour surveiller la rotation de l'échantillon en temps réel. Les expériences de vitesse de sédimentation et les expériences d'équilibre de sédimentation sont les deux principaux types d'expériences réalisées avec la centrifugation analytique.

Similitudes entre la centrifugation préparative et analytique

Différence entre la centrifugation préparative et analytique

Définition

Centrifugation Préparative: La centrifugation préparative fait référence à une centrifugeuse à grande vitesse utilisée dans la séparation de petites particules submicroscopiques.

Centrifugation analytique: La centrifugation analytique fait référence à une centrifugeuse à grande vitesse utilisée dans les processus analytiques.

Procédures analytiques

Centrifugation Préparative: La centrifugation préparative ne peut pas être utilisée dans les procédures analytiques.

Centrifugation analytique: La centrifugation analytique est utilisée dans les procédures analytiques.

Type d'échantillons

Centrifugation Préparative: La centrifugation préparative est utilisée pour agglomérer de petits matériaux tels que des membranes, des organites, des virus, de l'ADN plasmidique et de l'ARN.

Centrifugation analytique: La centrifugation analytique est utilisée pour déterminer la masse et la forme des macromolécules telles que les complexes protéiques et la vitesse de sédimentation des molécules.

Volume d'échantillon

Centrifugation Préparative: Une grande taille d'échantillon peut être traitée en centrifugation préparative.

Centrifugation analytique: Seuls de petits volumes d'échantillons (moins de 1 ml) peuvent être traités par centrifugation analytique.

Pureté de l'échantillon

Centrifugation Préparative: Des échantillons moins purs peuvent être utilisés dans la centrifugation préparative.

Centrifugation analytique: Des échantillons relativement purs sont utilisés dans la centrifugation analytique.

Coefficient de sédimentation et poids moléculaire

Centrifugation Préparative: La centrifugation préparative peut être utilisée pour déterminer le coefficient de sédimentation et le poids moléculaire.

Centrifugation analytique: Un coefficient de sédimentation et un poids moléculaire précis sont utilisés dans la centrifugation analytique.

Lecture optique

Centrifugation Préparative: Les fractions peuvent être collectées après l'analyse par centrifugation préparative et il n'y a pas de lecture optique pendant l'analyse.

Centrifugation analytique: L'avancement de la centrifugation analytique peut être observé visuellement pendant la centrifugation analytique.

Dispositions de refroidissement

Centrifugation Préparative: Aucun dispositif de refroidissement n'est utilisé dans la centrifugation préparative.

Centrifugation analytique: Comme la vitesse élevée génère plus de chaleur, un dispositif de refroidissement doit être utilisé dans la centrifugation analytique

Type d'appareils

Centrifugation Préparative: L5-65 et L5-75 sont utilisés dans la centrifugation préparative.

Centrifugation analytique: Le modèle Beckman E est utilisé dans la centrifugation analytique.

Conclusion

La centrifugation préparative et analytique sont les deux types de méthodes d'ultracentrifugation qui utilisent la centrifugation à grande vitesse. La centrifugation préparative est utilisée pour séparer les petites particules telles que les ribosomes, l'ADN plasmidique et l'ARN. Cependant, la centrifugation analytique est principalement utilisée pour obtenir des mesures analytiques de l'échantillon. La principale différence entre la centrifugation préparative et analytique réside dans le but de chaque type de centrifugation lors du traitement des échantillons.

Référence:

1. Aswathi K S, Étudiant à l'université centrale du Kerala Suivre. "Ultracentrifugation." LinkedIn SlideShare, 17 novembre 2015, disponible ici.

Image de courtoisie:

1. «Centrifugeuse préparative Beckman-Coulter Avanti J25-03» De son vrai nom: Matylda Sękpl.wiki: Cygaretkacommons: Cygaretka - Travail personnel (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia 2. «Ultracentrifugeuse» Par Mlw3559 sur Wikibooks anglais (CC BY-SA 2.5) via Commons Wikimedia