Les différence principale entre la nitrocellulose et la membrane en nylon est que le la membrane de nitrocellulose a une affinité élevée pour la liaison aux protéines tandis que la membrane en nylon a une affinité élevée pour la liaison aux acides nucléiques. De plus, les interactions hydrophobes et électrostatiques lient les macromolécules aux membranes de nitrocellulose tandis que les interactions ioniques, hydrophobes et électrostatiques lient les macromolécules aux membranes en nylon.

La nitrocellulose et la membrane en nylon sont deux types de membranes vers lesquelles les macromolécules sont transférées du gel. Cependant, les membranes de nitrocellulose peuvent également être utilisées pour lier l'ADN et l'ARN.

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Qu'est-ce qu'une membrane de nitrocellulose

La membrane de nitrocellulose est une matrice couramment utilisée dans le transfert de Western en raison de la forte affinité de liaison aux protéines. Cependant, il peut être utilisé pour détecter des acides nucléiques en dehors des protéines et des glycoprotéines immobilisées. L'immobilisation des macromolécules se fait principalement par des interactions hydrophobes. Des liaisons hydrogène se forment également entre les groupes nitro de la membrane et les chaînes latérales d'acides aminés des protéines. L'immobilisation des protéines sera élevée dans les concentrations élevées en sel et faibles en méthanol.

Figure 1: Principe du Blot

Les membranes de nitrocellulose sont disponibles sous des formes 100% pures de nitrocellulose avec une surface spécifique élevée, qui est uniforme. Les pré-tailles disponibles sont de 0,2 m et 0,45 m. La petite taille des pores est meilleure pour la liaison avec de petites protéines (<14 kDa). La capacité de liaison et de rétention des protéines est de 80-250 g/cm². Les membranes pré-assemblées sont prêtes à l'emploi. L'un des principaux avantages des membranes en nitrocellulose est leur très faible bruit de fond car ils peuvent être facilement bloqués. Les membranes de nitrocellulose supportées peuvent être décapées et résondées.

Qu'est-ce qu'une membrane en nylon

La membrane en nylon est une matrice largement utilisée pour la liaison des acides nucléiques. Les membranes en nylon sont mécaniquement plus résistantes que les membranes en nitrocellulose. Les deux principaux types de membranes en nylon utilisées dans le buvardage sont Biodyne A et Biodyne B. La taille des pores des deux types est de 0,45 µm. Ils résistent à la chaleur et aux solvants. De plus, ils ne rétréciront pas, ne se fissureront pas et ne se déchireront pas. Les deux donnent un bruit de fond plus faible que les membranes de nitrocellulose.

Figure 2: Membrane Southern Blot

Similitudes entre la nitrocellulose et la membrane en nylon

Différence entre la nitrocellulose et la membrane en nylon

Définition

La membrane de nitrocellulose fait référence à une membrane collante utilisée pour immobiliser les acides nucléiques et les protéines dans le transfert, tandis que la membrane en nylon fait référence à un type de membrane à haute résistance et résistance à la chaleur utilisée pour immobiliser les macromolécules.

Composé de

Les membranes en nitrocellulose sont constituées de cellulose nitrée tandis que les membranes en nylon sont constituées de nylon Biodyne A et Biodyne B non modifié ou chargé positivement.

Taille des pores

La taille des pores des membranes en nitrocellulose est de 0,2 µm et 0,45 µm tandis que la taille des pores des membranes en nylon est de 0,45 µm.

Force

Les membranes en nitrocellulose sont fragiles et donc non réutilisables tandis que les membranes en nylon sont mécaniquement résistantes.

Méthode de transfert

Le transfert électrophorétique est principalement utilisé dans le transfert de protéines sur les membranes de nitrocellulose tandis que le transfert capillaire est la pratique courante avec les membranes en nylon.

Affinité

Les membranes en nitrocellulose ont une affinité élevée pour les protéines tandis que les membranes en nylon ont une affinité élevée pour les acides nucléiques. Les membranes de nitrocellulose peuvent également être utilisées pour les acides nucléiques.

buvard

Les membranes en nitrocellulose sont meilleures pour le Western Blot, tandis que les membranes en nylon sont meilleures pour le Southern et le Northern Blot.

Interactions de liaison

Les interactions hydrophobes et électrostatiques lient les macromolécules aux membranes de nitrocellulose tandis que les interactions ioniques, hydrophobes et électrostatiques lient les macromolécules aux membranes en nylon.

Capacité de liaison aux protéines

La capacité de liaison aux protéines de la membrane de nitrocellulose est de 80-250 g/cm² tandis que la capacité de liaison aux protéines de la membrane en nylon est de 150 à 200 g/cm².

Conclusion

La membrane de nitrocellulose est une membrane fragile principalement utilisée pour immobiliser les protéines dans le transfert Western, tandis que la membrane en nylon est une membrane solide principalement utilisée pour immobiliser les acides nucléiques. Les membranes en nitrocellulose lient les molécules par des interactions hydrophobes tandis que les membranes en nylon lient les molécules par des interactions électrostatiques. Par conséquent, la principale différence entre la nitrocellulose et la membrane en nylon est l'affinité.

Référence:

1. « Membranes de nitrocellulose pour Western Blot | Thermo Fisher Scientific - LK. Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, disponible ici2. « Membrane en nylon Biodyne A, 0,45 m, 8 cm x 12 cm. » Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, disponible ici3. "Membrane en nylon Biodyne B, 0,45 m, 8 cm x 12 cm." Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, disponible ici

Image de courtoisie:

1. « Blot biologie » par Gbdivers - Travail personnel (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia2. «Membrane de transfert sud» de Bojan Žunar - Travail personnel (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia