Différentes colorations sont utilisées dans la coloration de différents matériaux biologiques. Les taches réagissent avec une substance spécifique dans un échantillon biologique, donnant une couleur spécifique à cette substance. L'acétocarmine est un colorant utilisé pour la mise en évidence des acides nucléiques dans le chromosome. Il existe également d'autres raisons qui rendent l'acétocarmine plus appropriée comme colorant d'acide nucléique. Ils sont discutés dans cet article.

Domaines clés couverts

1. Qu'est-ce qu'une tache - Définition, types de taches 2. Qu'est-ce que l'acétocarmine - Définition, caractéristiques, préparation 3. Pourquoi l'acétocarmine est-elle utilisée dans les études sur les chromosomes mitotiques – Préparation, Utilisation de l'Acétocarmine

Termes clés: acétocarmine, chromosomes, formaldéhyde, hydrolyse, études chromosomiques mitotiques, taches

Qu'est-ce que la coloration

La coloration est une technique utilisée dans les études microscopiques d'échantillons biologiques pour améliorer le contraste de l'échantillon biologique au microscope. Il met en évidence les structures des tissus biologiques telles que les populations cellulaires spécifiques, les organites, l'ADN, les protéines, les glucides et les lipides. La tache peut être soit des produits chimiques synthétiques, soit des produits chimiques naturels provenant de plantes ou d'animaux. Les méthodes de coloration sont décrites ci-dessous.

1. Coloration simple – En coloration simple, une seule coloration est utilisée pour donner une seule couleur à l'ensemble de l'échantillon biologique.
2. Double coloration – En double coloration, deux colorants sont utilisés pour colorer des organites spécifiques ou une zone spécifique.
3. Coloration multiple – Dans la coloration multiple, plus de deux colorations sont utilisées pour la coloration spécifique de composants tels que les organites dans l'échantillon.

Qu'est-ce que l'acétocarmine

Le carmin est un colorant de base préparé à partir d'un insecte connu sous le nom de cactus Coccus. L'acétocarmine est produite en mélangeant du carmin avec de l'acide acétique glacial. Il s'agit d'un colorant spécifique à l'ADN utilisé pour la visualisation des chromosomes super-enroulés au cours des différentes étapes de la mitose.

Préparation de la teinture à l'acétocarmine

1. Dissoudre 10 g de carmin dans 1 L d'acide acétique glacial à 45 %.
2. Ajouter des granulés d'aluminium et chauffer au reflux pendant 24 h.
3. Filtrer dans des flacons sombres et conserver à 4°C.
4. La coloration peut être intensifiée par l'ajout de chlorure ferrique (ajouter 5 mL d'une solution de chlorure ferrique à 10 % pour 100 mL d'acétocarmine à %).

Pourquoi la coloration à l'acétocarmine est utilisée dans les études sur les chromosomes mitotiques

Généralement, l'acétocarmine est un colorant utilisé en coloration simple. Il colore à la fois le noyau et le cytoplasme. Afin de colorer les chromosomes tout en gardant le cytoplasme incolore, l'échantillon biologique doit d'abord être traité avec du formaldéhyde, puis, il peut être hydrolysé avec HCl à 60 ° C avec le temps d'hydrolyse correct. Enfin, il peut être traité avec de l'acétocarmine. L'acétocarmine produit de gros agrégats de colorants dans des conditions faiblement acides (pH 4-5). La démonstration de la mitose des racines d'oignon par coloration à l'acétocarmine est illustrée à la figure 1.

Figure 1: Mitose de racine d'oignon

Cependant, l'acétocarmine est légèrement toxique que les autres colorants d'acide nucléique tels que l'acéto-orcéine. Il est également moins cher que d'autres types de taches.

Conclusion

Les colorants sont utilisés dans les études microscopiques pour améliorer le contraste de composants biologiques spécifiques dans un échantillon. L'acétocarmine est un colorant utilisé pour colorer l'acide nucléique à l'intérieur des cellules. Comme l'acétocarmine colore spécifiquement les chromosomes en dehors du cytoplasme, il peut être utilisé pour visualiser les chromosomes dans les études mitotiques.

Référence:

1. « LA COLORATION À L'ACÉTOCARMINE ». Université d'État du Kansas, disponible ici. 2.J. A. Rattenbury (2009) Coloration spécifique de la substance nucléolaire avec de l'acéto-carmin, technologie de coloration, disponible ici.

Image de courtoisie:

1. «Mitose de racine d'oignon» Par staticd - Travail personnel (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia