Les différence principale entre la cytométrie en flux et le FACS est que La cytométrie en flux permet de collecter rapidement, précisément et simplement des données liées à de nombreux paramètres à partir d'un mélange fluide hétérogène contenant des cellules vivantes. Mais, FACS (tri cellulaire activé par fluorescence) est un dérivé de la cytométrie en flux qui permet de trier physiquement un mélange hétérogène de cellules en différentes populations. De plus, la cytométrie en flux utilise les propriétés différentielles de diffusion de la lumière des cellules pour collecter des données, tandis que FACS utilise des anticorps hautement spécifiques marqués avec des colorants fluorescents pour différencier les types de cellules. De plus, la cytométrie en flux utilise un capteur pour acquérir des données, mais FACS utilise un électro-aimant pour trier l'échantillon.

En bref, la cytométrie en flux et le FACS sont deux techniques de biologie cellulaire analytique utilisées pour profiler des cellules dans un mélange hétérogène. Généralement, la cytométrie en flux implique l'analyse cellulaire et la mesure de l'expression des protéines en tant que technique d'analyse supplémentaire de FACS, qui implique le tri des cellules dans une population mixte.

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Qu'est-ce que la cytométrie en flux

La cytométrie en flux est une technique analytique de biologie cellulaire, permettant de déterminer différents paramètres de cellules vivantes dans un mélange hétérogène. En outre, le premier dispositif de cytométrie en flux basé sur l'impédance a été inventé par Wallace H. Coulter en 1953. Habituellement, les différents paramètres mesurés par cytométrie en flux comprennent;

Traiter

De plus, la suspension de l'échantillon avec plusieurs types de cellules dans le fluide permet l'écoulement à travers le cytomètre en flux. À l'intérieur de laquelle, les cellules circulent idéalement une cellule à la fois à travers un faisceau laser. Ici, les types de cellules présentent des caractéristiques de diffusion de la lumière différentielles uniques aux types de cellules. Typiquement, cela peut être dû à l'expression différentielle des protéines, de la teneur en acides nucléiques, des composants intracellulaires ou des composants de la surface cellulaire.

Figure 1: Cytométrie en flux

Une analyse

En outre, en cytométrie en flux, différents types de motifs de diffusion de la lumière et de motifs d'émission de fluorescence interviennent dans l'analyse des types cellulaires. Ils comprennent la lumière diffusée vers l'avant et latéralement, l'émission de fluorescence et l'analyse multiparamétrique. Parmi ceux-ci, la lumière diffusée vers l'avant se réfracte de la cellule, continuant le long de la même voie par laquelle elle se déplace à l'origine. En outre, il aide à détecter la taille de la cellule. Pendant ce temps, la lumière diffusée latéralement se réfracte des cellules dans une direction qui se trouve à l'extérieur du chemin lumineux d'origine. Ainsi, il détermine la granularité et la complexité des différents types de cellules.

De plus, après excitation par la longueur d'onde compatible du laser, les molécules fluorescentes des cellules émettent une lumière fluorescente, facilitant l'identification des différentes structures des cellules. En plus de cela, des colorants fluorescents ou des anticorps marqués par fluorescence peuvent également être utilisés pour marquer des structures spécifiques des cellules. En dehors de cela, la lumière diffusée vers l'avant par rapport au côté est tracée à partir des populations de leucocytes, ce qui facilite l'identification spécifique des granulocytes et des lymphocytes.

Qu'est-ce que FACS

FACS (tri cellulaire activé par fluorescence) est un type modifié de cytométrie en flux. La principale caractéristique du FACS est sa capacité à séparer physiquement chaque type cellulaire dans le mélange hétérogène. Pour cela, cette technique utilise des anticorps spécifiques à la cible marqués par fluorescence pour identifier un type cellulaire particulier dans le mélange. Par conséquent, FACS sépare le mélange cellulaire hétérogène en deux autres types de cellules. En outre, FACS a d'abord été inventé par Len Herzenberg, qui a ensuite remporté le prix Kyoto en 2006 pour son travail fondateur.

Figure 2: FACS

Importance

Traiter

Habituellement, dans FACS, l'échantillon s'écoule à travers une buse vibrante, qui perturbe le flux en gouttelettes, contenant idéalement une cellule. Ensuite, ces gouttelettes traversent un anneau de charge électrique, qui trie physiquement les types de cellules en fonction de leur charge.

Similitudes entre la cytométrie en flux et le FACS

Différence entre la cytométrie en flux et le FACS

Définition

La cytométrie en flux fait référence à l'analyse du matériel biologique via la détection des propriétés d'absorption de lumière ou de fluorescence des cellules ou des fractions subcellulaires telles que les chromosomes lorsqu'ils passent dans un flux étroit à travers un faisceau laser. Pendant ce temps, FACS (tri cellulaire activé par fluorescence) fait référence à un type spécialisé de cytométrie en flux, fournissant une méthode pour trier un mélange hétérogène de cellules biologiques dans deux ou plusieurs conteneurs, une cellule à la fois, en fonction de la diffusion spécifique de la lumière et de la fluorescence. caractéristiques de chaque cellule.

Correspondance

La cytométrie en flux est une technique de biologie cellulaire analytique, tandis que FACS est un type spécialisé de cytométrie en flux.

Conséquence

La cytométrie en flux suit FACS, tandis que FACS est la première étape de l'analyse d'un mélange cellulaire hétérogène.

Importance

La cytométrie en flux implique l'analyse cellulaire et la mesure de l'expression des protéines en tant que technique d'analyse supplémentaire du FACS, tandis que le FACS implique le tri des cellules dans une population mixte.

Fonction

La cytométrie en flux mesure les propriétés des cellules telles que le nombre, la taille et la teneur en acides nucléiques des cellules, tandis que FACS sépare les cellules en sous-populations à partir d'un mélange hétérogène.

Méthode d'échantillonnage

La cytométrie en flux utilise les propriétés différentielles de diffusion de la lumière des cellules pour collecter des données, mais FACS utilise des anticorps hautement spécifiques marqués avec des colorants fluorescents pour différencier les types de cellules.

Méthode d'analyse

La cytométrie en flux utilise un capteur pour acquérir des données, mais FACS utilise un électro-aimant pour trier l'échantillon.

Conclusion

En résumé, la cytométrie en flux est une technique de biologie cellulaire analytique pour déterminer les caractéristiques des cellules dans un mélange hétérogène. Ainsi, il aide à déterminer le nombre de cellules, la taille et la teneur en acides nucléiques des cellules, etc. En outre, il utilise les propriétés de diffusion de la lumière différentielle des cellules uniques à chaque type de cellule dans le mélange. D'autre part, FACS est un type de cytométrie en flux qui permet de trier les cellules du mélange hétérogène en deux types ou plus. En outre, il utilise des anticorps marqués par fluorescence pour identifier spécifiquement les composants de différents types de cellules. Par conséquent, FACS est la première technique analytique suivie par la cytométrie en flux dans les tests d'expression de protéines. Par conséquent, la principale différence entre la cytométrie en flux et le FACS réside dans la méthode de différenciation et de fonction cellulaire.

Les références:

1. Robinson, Ryan et Stefan Pellenz. "Ryan Robinson et Stefan Pellenz." Antibodies, 6 décembre 2013, disponible ici.2. « Cytométrie en flux (FCM) /FACS | Tri cellulaire activé par fluorescence (FACS).” Sino Biological, Sino Biological Inc., Disponible ici.

Image de courtoisie:

1. "Cytomètre" de Kierano - Travail personnel (CC BY 3.0) via Commons Wikimedia 2. "Tri cellulaire assisté par fluorescence (FACS) B" de SariSabban (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia