Les différence principale entre le clonage et le sous-clonage est que le clonage est la production de clones d'organismes ou de copies de cellules ou de fragments d'ADN, tandis que le sous-clonage est une technique utilisée pour déplacer une séquence d'ADN particulière d'un vecteur parent à un vecteur de destination. De plus, le clonage utilise un ADNc ou un gène primaire tandis que le sous-clonage implique la manipulation ultérieure du clone en changeant le vecteur ou l'insert primaire.

Le clonage et le sous-clonage sont deux techniques de biologie moléculaire permettant de manipuler les génomes d'organismes en introduisant des fragments d'ADN d'intérêt.

Clonage, vecteur d'expression, insertion, vecteur parent, sous-clonage

Qu'est-ce que le clonage

Le clonage est une technique de biologie moléculaire qui permet de fabriquer plusieurs molécules d'un fragment d'ADN d'intérêt. Par conséquent, il est également connu sous le nom de clonage moléculaire. Il peut être utilisé pour amplifier à la fois l'ADN codant et non codant, tels que les gènes et les séquences d'ADN régulatrices, y compris les promoteurs, respectivement. De plus, il a une grande variété d'applications allant des empreintes génétiques à la production de protéines à grande échelle.

Figure 1: Clonage moléculaire

De plus, les étapes du clonage sont les suivantes:

1. Fragmentation - briser un brin d'ADN par digestion de restriction
2. Ligature - coller ensemble des morceaux d'ADN dans la séquence souhaitée
3. Transfection - insertion des morceaux d'ADN nouvellement formés dans les cellules
4. Criblage/sélection – sélection des cellules qui ont été transfectées avec succès avec le nouvel ADN

Cependant, le clonage fait également référence à la production d'un grand nombre d'individus génétiquement identiques à partir d'un organisme parent. Il peut se produire naturellement dans l'environnement sous forme de reproduction. D'autre part, elle peut être réalisée à l'intérieur du laboratoire comme le font les techniques de culture tissulaire.

Qu'est-ce que le sous-clonage

Le sous-clonage est une technique de biologie moléculaire qui permet de déplacer l'ADN d'insertion du plasmide parent vers un second vecteur. Ici, le deuxième vecteur peut être un vecteur d'expression, qui permet l'expression du fragment d'ADN. De plus, il peut être utilisé pour modifier l'expression sous un promoteur différent. Ou bien, le deuxième vecteur peut contenir des caractéristiques particulières telles qu'un marqueur spécifique pour la sélection d'antibiotiques ou l'expression fluorescente.

Figure 2: Sous-clonage

1. Tout d'abord, libérez et purifiez l'insert du vecteur parent par digestion de restriction
2. Ligaturer l'insert dans un vecteur de destination préparé
3. Ensuite, transformer la réaction de ligature en cellules bactériennes compétentes
4. Tamiser les cellules transformées pour l'insert

Similitudes entre le clonage et le sous-clonage

Différence entre le clonage et le sous-clonage

Définition

Le clonage fait référence au processus de création de clones d'organismes ou de copies de cellules ou de fragments d'ADN, tandis que le sous-clonage fait référence à une technique utilisée pour déplacer une séquence d'ADN particulière d'un vecteur parent à un vecteur de destination. C'est donc la principale différence entre le clonage et le sous-clonage.

Importance

Type de vecteurs

Le type de vecteurs est une autre différence entre le clonage et le sous-clonage. Le clonage utilise souvent des vecteurs de clonage tandis que le sous-clonage peut utiliser des vecteurs d'expression.

Conclusion

Le clonage est une technique de biologie moléculaire qui permet d'introduire un fragment d'ADN d'intérêt dans un organisme hôte ou de construire des bibliothèques d'ADN, tandis que le sous-clonage est une autre technique de biologie moléculaire qui permet d'introduire également un fragment d'ADN d'un vecteur parent dans un autre vecteur. C'est donc la principale différence entre le clonage et le sous-clonage.

Les références:

1. « Applications et stratégies de clonage courantes ». Thermo Fisher Scientific – États-Unis, disponible ici.

Image de courtoisie:

1. «Figure 17 01 06» par CNX OpenStax (CC BY 4.0) via Commons Wikimedia 2. «Étapes du clonage moléculaire» par Alexpicardal97 - Travail personnel (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia